FACULTAD DE FARMACIA
LICENCIATURA EN FARMACIA


Técnicas de separación (Curso Académico 2009/10)

Tipo: Optativa
Créditos: Teóricos: 3. Prácticos: 1.5.
Curso: Curso 4º. Segundo Cuatrimestre.
 
Programa teórico:
TEMA 1.- Introducción a la cromatografía. Concepto de cromatografía. Clasificación. Equilibrios de distribución. Isotermas lineales. Parámetros de distribución. Cromatografía de elución lineal. Parámetros de retención. Migración. Retención en capa fina .

TEMA 2.- Teorías de la cromatografía. Teoría de los platos. Eficacia de la columna. Teoría Cinética . Ecuación general. Diferencias entre C.G. y C.L. Resolución. Tiempo de separación. Condiciones óptimas de eficacia de la columna. Elución por gradiente y programación de temperatura. Aplicaciones. Método de calibración con patrones. Normalización de áreas. Patrón interno.

TEMA 3.- Instrumentación de cromatografía de gases. Gas portador. Inyección de muestra. .Columnas. Fases estacionarias. Detectores: de conductividad térmica, de ionización de llama, de captura de electrones, de emisión atómica.

TEMA 4.- Cromatografía de gases. Volúmenes de retención en CG, volumen específico.Aplicaciones: aplicación a productos farmaceúticos. Interpretación cualitativa de un cromatograma: Retención relativa. Relación de Oster. Índice de retención de Kovats. Acoplamientos con espectrometría de masas.

TEMA 5.- Instrumentación de HPLC. Fase móvil. Sistema de presión. Columnas. Relleno de columnas. Detectores : de absorbancia UV-V, de fluorescencia, electroquímicos, de índice de refracción, de dispersión . Acoplamientos con espectrometría de masas: Ionización química a presión atmosférica. Electronebulización

TEMA 6.- Cromatografía líquida. Clasificación. Cromatografía de adsorción Fases estacionarias. Mecanismo de separación. Fase móvil, fuerza eluyente ( 0 B )

TEMA 7.- Cromatografía líquido-líquido o de reparto. Cromatografía en fase normal. Cromatografía en fase inversa. Ïndice de polaridad de la fase móvil. Mecanismo. Aplicaciones. Cromatografía de pares de iones.

TEMA 8.- Cromatografía de intercambio iónico. Tipos de resinas intercambiadoras. Mecanismo de intercambio iónico. Cromatografía con columnas supresoras.

TEMA 9.- Cromatografía de exclusión. Mecanismo. Parámetros. Aplicaciones.

TEMA 10.- Otras cromatografías. Cromatografía de afinidad . Matrices y ligandos. Elución bioespecífica y no específica . C romatografía de fluidos supercríticos. Propiedades de los fluidos supercríticos. Instrumentación. Fases estacionarias y móviles. Efecto de la presión. Detectores. Comparación con otros métodos.

TEMA 11.- Electroforesis. Fenómenos electrocinéticos. Fenómenos electrocinéticos. Electroforesis de zona. Factores que afectan a la electroforesis. Inmunoelectroforesis .

TEMA 12 .- Electroforesis en geles de poliacrilamida . Aplicación a la separación de proteínas. Condiciones no desnaturalizantes. Representación de Ferguson.. Condiciones desnaturalizantes. P.A.G.E.-SDS. Estimación de masas moleculares. Transferencia a membranas. Electroenfoque. Electroforesis bidimensional.

TEMA 13.- Electroforesis en geles de agarosa . Aplicación a la separación de ácidos nucleicos. Electroforesis de campo pulsante.

TEMA 14.- Electroforesis capilar. Instrumentación. migración y altura de plato en E.C.. Características del flujo electroosmótico. Detección.E:C. de zona. Isoelectroenfoque capilar. Electrocromatografía capilar. Cromatografía capilar electrocinética micelar.

TEMA 15.- Sedimentación. Ultracentrifugación y Sedimentación. Transporte bajo fuerzas centrífugas.. Ecuación de Lamm. Soluciones de la ecuación de Lamm. Ecuación de Svedberg .Determinación de parámetros moleculares. Sistemas de multicomponentes. Equilibrio de sedimentación. Equilibrios en gradiente de densidad.

 
Programa práctico:

PRÁCTICA 1.- SEPARACIÓN DE LOS COMPONENTES DEL SUERO SANGUÍNEO MEDIANTE ELECTROFORESIS.

PRÁCTICA 2.- SEPARACIÓN DE AMINOÁCIDOS MEDIANTE CROMATOGRAFÍA BIDIMENSIONAL EN CAPA FINA.

PRÁCTICA 3.- DETERMINACIÓN POTENCIOMÉTRICA DE FOSFATO EN UNA LEVADURA EN POLVO CON EXTRACCIÓN POR CROMATOGRAFÍA DE INTERCAMBIO IÓNICO.

PRÁCTICA 4.- CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA DE EXCLUSIÓN EN GEL.